Fluorescenčné farbivá označujú látky, ktoré vyžarujú svetelnú vlnu s určitou vlnovou dĺžkou, ktorá je väčšia ako svetelná vlna absorbujúca svetlo, a sú to väčšinou zlúčeniny, ktoré obsahujú benzénové kruhy alebo heterocykly a majú konjugované dvojité väzby.
Bežne používané fluorescenčné farbivá sú opísané nasledovne:
(1) Bežne používané fluorescenčné farbivá na imunofluorescenčné značenie
FITC (fluoresceín izotiokyanát): zelená 530 nm
PE (fykoerytrín): oranžová žltá 575 nm
Excitácia argónového iónu laserom s vlnovou dĺžkou 488 nm
APC (alofykokyanín): červená 660 nm
630nm vlnová dĺžka He-Ne laseru alebo excitácia laserom s červenou diódou
PerCP (polyphycoxanthin chlorofyl protein): tmavo červená 675 nm
PI (propidium jodid): oranžovo červená 620 nm
(2) Bunková autofluorescencia
Autofluorescenčný signál je šumový signál, ktorý vo väčšine prípadov bude interferovať s rozlíšením a meraním špecifických fluorescenčných signálov. Pri meraní imunocytochémie atď. Je pre fluorescenčné protilátky s nízkou úrovňou väzby kľúčové, ako zlepšiť pomer signálu k šumu.
(3) Imunofluorescenčné značenie
Bežne používaným značením markerov je priame imunofluorescenčné farbenie a nepriame imunofluorescenčné farbenie. Pri vykonávaní dvojparametrovej alebo viacparametrickej analýzy je často potrebné vykonať kombinované značenie fluorescenčných protilátok. V súčasnosti existujú dvojfarebné, trojfarebné a štvorfarebné štítky.